Исследование влияния способов доставки нуклеазы Cas9 на уровень нокаута в Т-лимфоцитах при использовании системы геномного редактирования CRISPR /Cas9 на экспериментальной модели Т-клеточной линии Jurkat
Ключевые слова:
CRISPR /Cas9, sgRNA, ген TRAC, ген B2M, нокаут, CARАннотация
Разработка аллогенных CAR-T-клеток представляет собой перспективное направление в иммунотерапии онкологических заболеваний, которое позволяет преодолеть ограничения, возникающие при использовании аутологичных Т-клеток. Одним из ключевых этапов создания таких клеток является эффективное введение в них компонентов системы геномного редактирования CRISPR /Cas9. В настоящей статье рассматриваются стратегии оптимизации параметров электропорации нуклеазы Cas9 (мРНК, белок, плазмидный вектор) для повышения эффективности редактирования генома. Оптимизированный протокол может способствовать стандартизации производства аллогенных CAR-T-продуктов, улучшая их терапевтическую эффективность и безопасность.
Библиографические ссылки
- Кушнерова ЕВ, Мигас АА, Клыч АВ, Ласюков ЕА, Мелешко АН. Нокаут генов Т-клеточного рецептора и HLA класса I в клетках человека с использованием системы CRISPR /Cas9. Экспериментальная биология и биотехнология. 2022;2:19–26. DOI: 10.33581/2957-5060-2022-2-19-26.
- Покладок ЕС, Мелешко АН, Кушнерова ЕВ. Оценка эффективности нокаута Т-клеточного рецептора и MHCI в клетках Т-лимфоцитов с использованием различных экспрессионных кассет. В: Мартинович Г, Волотовский ИД, Лукьяненко ЛМ, Слобожанина ЕИ, Кабашникова ЛФ, Вересов ВГ и др., редакторы. Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем. Тезисы докладов 16-й Международной научной конференции; 25–27 июня 2024 г.; Минск, Беларусь. Минск: БГУ; 2024. с. 263–264.
- Kagoya Y, Guo T, Yeung B, Saso K, Anczurowski M, Wang C-H, et al. Genetic ablation of HLA class I, class II, and the T cell receptor enables allogeneic T cells to be used for adoptive T cell therapy. Cancer Immunology Research. 2020;8(7):926–936. DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-18-0508.
- Ren J, Liu X, Fang C, Jiang S, June CH, Zhao Y. Multiplex genome editing to generate universal CAR T cells resistant to PD1 inhibition. Clinical Cancer Research. 2017;23(9):2255–2266. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-16-1300.
- Stenger D, Stief TA, Kaeuferle T, Willier S, Rataj F, Schober K, et al. Endogenous TCR promotes in vivo persistence of CD19-CAR-T cells compared to a CRISPR/Cas9-mediated TCR knockout CAR. Blood. 2020;136(12):1407–1418. DOI: 10.1182/blood.2020005185.
- Nakazawa Y, Huye LE, Dotti G, Foster AE, Vera JF, Manuri PR, et al. Optimization of the PiggyBac transposon system for the sustained genetic modification of human T lymphocytes. Journal of Immunotherapy. 2009;32(8):826–836. DOI: 10.1097/CJI.0b013e3181ad762b.
Загрузки
Опубликован
Выпуск
Раздел
Лицензия
Copyright (c) 2026 Экспериментальная биология и биотехнология
Это произведение доступно по лицензии Creative Commons «Attribution-NonCommercial» («Атрибуция — Некоммерческое использование») 4.0 Всемирная.
Авторы, публикующиеся в данном журнале, соглашаются со следующим:
- Авторы сохраняют за собой авторские права на работу и предоставляют журналу право первой публикации работы на условиях лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial. 4.0 International (CC BY-NC 4.0).
- Авторы сохраняют право заключать отдельные контрактные договоренности, касающиеся неэксклюзивного распространения версии работы в опубликованном здесь виде (например, размещение ее в институтском хранилище, публикацию в книге) со ссылкой на ее оригинальную публикацию в этом журнале.
- Авторы имеют право размещать их работу в интернете (например, в институтском хранилище или на персональном сайте) до и во время процесса рассмотрения ее данным журналом, так как это может привести к продуктивному обсуждению и большему количеству ссылок на данную работу. (См. The Effect of Open Access).
