Биосинтез рекомбинантного овечьего интеферона-α в клетках Еsсherichia coli

Авторы

  • Кристина Владимировна Острикова Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь
  • Максим Иосифович Потапович Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь
  • Владимир Антонович Прокулевич Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь

Ключевые слова:

клонирование, экспрессия, овечий интерферон-α, индукция, рекомбинантный белок, масс-спектрометрический анализ

Аннотация

Обозначена актуальная для животноводства и, в частности, овцеводства проблема инфекционных заболеваний, приводящих к значительным экономическим потерям. Отмечается отсутствие антивирусных лечебных ветеринарных препаратов, несмотря на выпуск огромного количества антибиотиков для лечения заболеваний бактериальной этиологии. Обращается внимание на перспективность производства препаратов интерферонов. В ходе настоящего эксперимента последовательность гена овечьего интерферона-α оптимизирована для экспрессии в грамотрицательных бактериях и клонирована в клетках Еscherichia соli в составе вектора рЕТ24b. Получен штамм-продуцент рекомбинантного овечьего интерферона-α с максимальной продуктивностью, составляющей около 40 % общего клеточного белка. 

Биографии авторов

  • Кристина Владимировна Острикова, Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь

    аспирантка кафедры микробиологии биологического факультета. Научный руководитель – В. А. Прокулевич

  • Максим Иосифович Потапович, Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь

    заведующий научноисследовательской лабораторией биотехнологии кафедры микробиологии биологического факультета

  • Владимир Антонович Прокулевич, Белорусский государственный университет, пр. Независимости, 4, 220030, г. Минск, Беларусь

    доктор биологических наук, профессор; заведующий кафедрой микробиологии биологического факультета

Библиографические ссылки

  1. Dankvert S. A., Kholmanov A. M., Osadchaya O. Y. [Sheep breeding of the countries of the world]. Mosсow, 2010 (in Russ.).
  2. Dorosh M. [Diseases of sheep and goats]. URL: http://www.e-reading.club/book.php?book=84004 (date of access: 11.03.2016) (in Russ.).
  3. A. Meager (ed.). The Interferons: Characterization and application. Weinheim, 2006.
  4. Kalliolias G. D., Ivashkiv L. B. Overview of the biology of type I interferons. Arthr. Res. Ther. 2010. Vol. 12, suppl. 1. P. 1–9. DOI: 10.1186/ar2881.
  5. Woelk C. H., Frost S. D., Richman D. D., et al. Evolution of the interferon alpha gene family in eutherian mammals. Gene. 2007. Vol. 397. P. 38–50. DOI: 10.1016/j.gene.2007.03.018.
  6. Sen G. C. Viruses and interferons. Annu. Rev. Microbiol. 2001. Vol. 55. P. 255–281. DOI: 10.1146/annurev.micro.55.1.255.
  7. Donnelly R. P., Kotenko S. V. Interferon-lambda: a new addition to an old family. J. Interferon Cytokine Res. 2010. Vol. 30, issue 8. P. 555–564. DOI: 10.1089/jir.2010.0078.
  8. Hong M., Schwerk J., Lim C. Interferon lambda 4 expression is suppressed by the host during viral infection. J. Exp. Med. 2016. Vol. 213, issue 12. P. 2539 –2552. DOI: 10.1084/jem.20160437.
  9. XL-1 Blue Competent Cells. Manual. URL: http://www.chem-agilent.com/pdf/strata/200249.pdf (date of access: 18.12.2016).
  10. BL21-CodonPlus Competent Cells. Instruction Manual. URL: http://www.chem-agilent.com/pdf/strata/230240.pdf (date of access: 20.01.2017).
  11. Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970. Vol. 227. P. 680 – 685.
  12. Codon Usage Database. URL: http://www.kazusa.or.jp/codon/ (date of access: 01.04.2015).
  13. Schneider C. A., Rasband W. S., Eliceiri K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nat. Methods. 2012. Vol. 9, No. 7. P. 671– 675.
  14. Fish E. N. Definition of Receptor Binding Domains in Interferon-α. J. Interferon Res. 1992. Vol. 12, issue 4. P. 257–266.
  15. pET Manual system. URL: http://kirschner.med.harvard.edu/files/protocols/Novagen_petsystem.pdf/ (date of access: 02.06.2016).

Загрузки

Опубликован

2017-12-16

Выпуск

Раздел

Генетика, микробиология и молекулярная биология

Как цитировать

Острикова, К. В., Потапович, М. И., & Прокулевич, В. А. (2017). Биосинтез рекомбинантного овечьего интеферона-α в клетках Еsсherichia coli. Экспериментальная биология и биотехнология, 2, 43-50. https://journals.bsu.by/index.php/biology/article/view/2444